Кто на сайте
Сейчас на сайте находятся:
 90 гостей 
Главная -> Материалы -> Лабораторная диагностика -> Современные подходы к диагностике инфекционных заболеваний.
АНКЕТА

для оценки качества оказания услуг медицинскими организациями в амбулаторных условиях

Мобильное приложение тестирования

Для Андроида

Современные подходы к диагностике инфекционных заболеваний.

Инфекционные заболевания человека представляют собой группу болезней, вызываемых специфическими болезнетворными возбудителями, которые могут передаваться от зараженного человека здоровому. Для каждой инфекции характерен свой возбудитель и определенный путь передачи. Возбудителями инфекций могут быть бактерии, вирусы, риккетсии (микроорганизмы, сочетающие в себе особенности бактерий и вирусов), спирохеты, грибки, протозойные (паразитирующие простейшие, одноклеточные), глисты, которые выводятся из организма больного человека или животного при выдохе, мочеиспускании, дефекации, кашле, рвоте, и когда при определенных условиях этот биологический патологический материал становится источником заражения здорового человека. Известны инфекционные болезни, вызываемые, так называемыми арбовирусами – вирусами, передающимися людям через укусы насекомых: например клещей, комаров, блох и др. Согласно литературным данным в настоящее время известно 1415 возбудителей инфекционных и паразитарных болезней. Наиболее обширную группу составляют болезни, вызываемые бактериями и риккетсиями (538 нозологий). Второе место принадлежит паразитарным болезням - 353 нозологии. Вирусные инфекции составляют 217 нозологий. Постоянно возникают новые или впервые выявленные инфекционные заболевания. Так, начиная, с 1970-х годов ежегодно регистрируется, по крайней мере, одно инфекционное заболевание. За последние годы стали известны более 30 инфекционных заболевании, это и ВИЧ, легионеллез, эпидемический ротавирусный гастроэнтерит и ряд африканских лихорадок (например лихорадка Эбола).

Инфекционные заболевания вызывают у пациента значительные изменения в картине крови. При многих инфекционных болезнях изменяется функция различных внутренних органов – печени, сердца, легких, мозга, почек, кишечника. Практически все инфекционные заболевания протекают с изменениями широкого спектра биохимических параметров, отражающих различные стороны патогенеза. Установлено также, что, к примеру, вирусы краснухи, герпеса, коксаки, полиомиелита, цитомегаловирус и эховирусы (род энтеровирусов) могут вызывать серьезные нарушения в развитии плода и новорожденного.

Диагноз инфекционного заболевания основывается на анамнезе больного, эпидемиологическом анамнезе, включает инструментальные методы обследования и, как правило, диагностика инфекционных заболеваний не обходится без использования комплекса лабораторных методов.

Диагностика инфекционного заболевания начинается с базовых лабораторных методов исследования.  Это:

1.  клинический анализ крови;

2.  общий анализ мочи является лабораторным тестом, который часто используется при исследования инфекционных заболеваний не только почек, но и инфекций другой локализации. Так некоторые инфекционные заболевания сопровождаются протеинурией нефротического типа (количество белка в моче не менее 3г/л). Например хронические инфекционные заболевания могут стать причиной нефротического синдрома. Развитие протеинурии нефротического типа могут вызвать, например, бактериальный эндокардит, туберкулез, сифилис, лепра, гепатит В и С, мононуклеоз, цитомегаловирусная инфекция, ветряная оспа, малярия, токсоплазмоз, шистосомиаз. Появление в моче бактерий и возникновение воспаления указывает на наличие инфекционного заболевания мочеполовой системы.

3.  Достаточно эффективным при инфекционных заболеваниях является использование комплекса биохимических тестов, поскольку количественные и качественные изменения биохимических показателей в крови,  происходящие во время болезни, отражают происходящие при заболевании биохимические нарушения и позволяют следить за динамикой патологического процесса и адекватностью лечения. К таким эффективным биохимическим параметрам, относится – спектр белков сыворотки крови (белки острой фазы), ферменты и некоторые другие биохимические показатели.

Также,  в  арсенале специалистов в настоящее время есть новейшие, появившиеся в последние  десятилетия и нашедшие широкое применение в практике,  разнообразные методы лабораторной диагностики.

Клиническая лабораторная диагностика является наиболее динамично развивающейся отраслью медицины, активно внедряющей и использующей современные научные достижения. Для оценки морфофункционального состояния отдельных органов и систем, диагностики многих болезней используют сотни различных лабораторно-клинических показателей (тестов). Глубина познания физиологических и патологических  процессов, диагностическая значимость и надежность исследований зависят от правильности подбора лабораторно-клинических показателей.

В диагностике инфекционных болезней используют многочисленные лабораторно-инструментальные методы,  среди которых важнейшее место занимают специфические методы (бактериологический, вирусологический,  паразитологический, серологический), имеющие целью установление этиологического (нозологического) диагноза.

Материал для специфических методов исследования в зависимости от характера, формы и периода болезни может быть самым разнообразным: кровь, цереброспинальная жидкость, мокрота, фекалии, моча, дуоденальное содержимое, пунктаты и биоптаты органов, рвотные массы, отделяемое язв, смывы со слизистых оболочек, трупный материал.

Паразитологическое  обследование основано на микроскопии толстой капли и мазков крови (при малярии), мазков крови и пунктатов лимфатических узлов (при трипаносомозе, токсоплазмозе), кала (при амебиазе, балантидиазе), испражнений и дуоденального содержимого (при лямблиозе).

Бактериологическое исследование  включает посев материала, взятого у больного на питательные среды, выделение чистой культуры возбудителя и его идентификацию. Определение типовой принадлежности микроба-возбудителя имеет эпидемиологическое значение при выявлении источника инфекции.

Вирусологическая диагностика по сравнению с бактериологической более сложна и трудоемка, что связано с особенностями биологии вирусов. Среди них наиболее важной является облигатный внутриклеточный паразитизм вирусов, что и накладывает отпечаток на методы их выделения с использование тканевых культур или куриных эмбрионов.

Иммунологические методы применяются для определения неизвестных антигенов (АГ) с помощью известных антител (АТ), содержащихся в иммунных диагностических сыворотках, а также для серологической диагностики—определения неизвестных АТ с помощью известного АГ-диагностикума. В настоящее время существует множество методик, в основе которых лежат указанные принципы. К наиболее известным и широко распространенным иммунологическим методам относятся:

  1. Реакция агглютинации (РА)
  2. Реакция непрямой (пассивной) агглютинации (РНГА/РИГА)
  3. Реакция преципитации (РП)
  4. Реакция иммуноэлектрофореза (РИЭФ)
  5. Реакция связывания комплемента (РСК)
  6. Реакция иммунофлюоресценции (РИФ)
  7. Иммуноферментный анализ (ИФА)

Указанные методы давно применяются для диагностики инфекционных заболеваний и прочно вошли в медицинскую практику. В настоящее время на базе этих, уже ставших классическими, методов разработаны современные методики, такие как латекс-агглютинация, иммунохроматографические тесты, позволяющие быстро получать результаты.  Достижением последнего десятилетия стало создание различных приборов, обеспечивающих автоматизацию процессов выполнения и анализа результатов исследований.

  • Латекс-агглютинация (РЛА) – агглютинация антителами частиц латекса, на поверхности которых адсорбирован антиген или гаптен. Для постановки РЛА   применяют сенсибилизированные частицы полистирольного латекса, которые в присутствии гомологичного реагента склеиваются. Обычно эта реакция проходит очень быстро  (3-8 минут), что позволяет применить ее в качестве экспресс-метода для выявления антигенов и антител. Преимущество РЛА в том, что частицы латекса в отличие от эритроцитов не имеют перекрестно реагирующих антигенов, поэтому она специфичнее РНГА.
  • Иммунохроматографический  анализ (ИХА) – метод определения наличия определенных концентраций вещества в биологических материалах (моча, цельная кровь, сыворотка или плазма крови, слюна, кал и т.д.).  Данный вид анализа осуществляется при помощи индикаторных полосок, палочек, панелей или тест-кассет, которые обеспечивают быстроту проведения тестирования. ИХА – сравнительно молодой метод анализа, он часто обозначается в литературе также как метод сухой иммунохимии, стрип-тест, QuikStrip cassette,  QuikStrip  dipstick,  экспресс-тест или экспресс-анализ. Эти названия связаны с быстротой проведения теста.
  • Иммунофлюоресцентная диагностика, основанная на специфическом свечении комплекса антиген-антитело, позволяет получить ответ через несколько минут после обработки препарата из первичного материала специфической флюоресцирующей сывороткой.
  • Масс-спектрометрия (MALDI-TOF MS) – спектральный метод изучения целых бактериальных клеток и их основных компонентов, основанный на измерении массы молекул или атомов, позволяющий проводить как прямое белковое профилирование для видовой идентификации микроорганизмов, так и обнаружение генетических маркеров лекарственной устойчивости. Преимуществами данного метода является высокая скорость видовой идентификации микроорганизмов  (2-5 мин.), возможность автоматизации и роботизации всех стадий исследования, а также  высокая специфичность.

Все более востребованными становятся молекулярно-генетические методы, такие как полимеразная цепная реакция (ПЦР) и, на основе него,  анализ эволюционно-консервативных генов,  фрагментация генома и анализ спектра фрагментов, гибридизация на микрочипах, геномная гибридизация, геномная амплификация и секвенирование/пиросеквенирование.

В основе метода ПЦР  лежит комплементарное достраивание ДНК матрицы, осуществляемое  in vitro с помощью фрагмента ДНК-полимеразы. Эта реакция носит название репликации ДНК. Преимущества метода ПЦР как метода диагностики инфекционных заболеваний – это прямое определение наличия возбудителей. Многие традиционные методы диагностики, например иммуноферментный анализ, выявляют белки-маркеры, являющиеся продуктами жизнедеятельности инфекционных агентов, что дает лишь опосредованное свидетельство наличия инфекции. Выявление специфического участка ДНК возбудителя методом ПЦР дает прямое указание на присутствие возбудителя инфекции. Применение ПЦР-диагностики также очень эффективно в отношении возбудителей с высокой антигенной изменчивостью и внутриклеточных  паразитов. Следует отметить, что методом ПЦР возможно выявление возбудителей не только в клиническом материале, полученном от больного, но и в материале, получаемом из объектов внешней среды (вода, почва и т.д.).

Секвенирование/пиросеквенирование и др. молекулярно-генетические методы –  это общее название методов, которые позволяют установить последовательность нуклеотидов в молекуле ДНК. В настоящее время нет ни одного метода секвенирования, который бы работал для молекулы ДНК целиком, все они устроены так: сначала готовится большое число небольших участков ДНК (клонируется молекула ДНК многократно и «разрезается» в случайных местах), а потом читается каждый участок по отдельности. Эти методы активно  примененяются в научно-исследовательском изучении микроорганизмов, вызывающих инфекционные заболевания.  Наряду с преимуществами,  молекулярно-генетические методы обладают рядом недостатков, таких как отсутствие выделения культуры возбудителя, что не позволяет изучать свойства микроорганизмов; невозможность выявления фенотипической устойчивости к антимикробным средствам (возможно выявление только генетических маркеров устойчивости); некоторые ограничения, связанные с наличием зарегистрированных тест-систем для выявления неполного спектра возбудителей инфекционных болезней.

Таким образом, современная лабораторная диагностика инфекционных болезней обладает широким спектром разнообразных методов и способов исследований, сочетание которых позволяет оперативно решать поставленные задачи, доступных для использования в рутинной практике.

Значение диагностики, как процесса распознавания болезней, состоит в том, что ранний, точный, исчерпывающий и максимально конкретный диагноз является основой для проведения рациональной и эффективной терапии, позволяет в большинстве случаев предсказать возможные варианты дальнейшего течения и исходов заболевания, а в инфекционной патологии служит еще и исходным моментом в проведении своевременных и направленных противоэпидемических и профилактических мероприятий.

На базе клинико-иммунологической лаборатории ГУЗ «Липецкий областной Центр по профилактике и борьбе со СПИД и инфекционными заболеваниями» проводится диагностика инфекционных заболеваний различными методами исследования, что позволяет в наиболее короткие сроки поставить точный диагноз и своевременно начать лечение, а, следовательно, избежать осложнений перенесенной инфекции.

биолог КИЛ  Спирина Е.Н.

Телефон "Доверия"
8(4742)34-20-77
(Время работы с 8:00 до 16.00 суббота, воскресенье -выходной)
Контакты
e-mail: aids-centre@mail.ru Приемная гл. врача: (факс) 8(4742) 35-54-42
8(4742) 34-20-70 – регистратура (по приему врачей, стоимости платных услуг и т.д.)
Поиск